Thiocyanate Guanidine | 593-84-0 | is denaturant próitéin láidir. Is púdar bán criostalach é, greannach agus íogair don solas. Tá sé intuaslagtha in eatánól agus in uisce, le leáphointe 118℃. Úsáidtear thiocyanate guanidine go príomha le haghaidh dínádúrú, lysis cealla agus eastóscadh RNA agus DNA. Is comhpháirt cheimiceach coitianta í le haghaidh eastóscadh aigéad núicléach.
Nochtann paitinn cn111500664a modh chun núicléatídí agus polaipeiptídí a bhaint as viscera ainmhithe ag baint úsáide as thiocyanáit guanidine. Is comhdhúile iad núicléatídí atá comhdhéanta de bhonn purine nó bonn pirimidín, ribose nó deoxyribose agus aigéad fosfarach, a úsáidtear go forleathan i míochaine, táirgí máthair agus leanbh, tarsainn agus breiseáin bia. Tá polaipeiptíde Î ± - Is táirgí idirmheánacha hidrealú próitéine iad comhdhúile a fhoirmíonn aimínaigéid atá nasctha le chéile ag bannaí peiptíde, a bhaineann le réimsí éagsúla hormóin daonna, néaróga, fás cille agus atáirgeadh. Tá a dtábhacht ag rialú feidhmeanna fiseolaíocha córais agus cealla éagsúla sa chorp, einsímí ábhartha sa chorp a ghníomhachtú, tréscaoilteacht membrane meitibileach idirmheánach a chur chun cinn, nó trascríobh DNA a rialú nó tionchar a imirt ar shintéis próitéin ar leith, Faoi dheireadh éifeachtaí fiseolaíocha ar leith a tháirgeadh.
Tá viscera ainmhithe saibhir i núicléatídí agus peiptídí, ach faoi láthair, déantar eastóscadh núicléatídí agus peiptídí ar leithligh den chuid is mó, agus dramhaíl acmhainní agus próisis chasta mar thoradh air. Tá thiocyanate Guanidine cabhrach chun núicléatídí agus peiptídí a bhaint as viscera ainmhithe. Is iad seo a leanas na modhanna sonracha:
Ar dtús, nigh viscera ainmhithe úra, taosc iad, déan iad a chopáil, ansin iad a mhash, cuir uisce dí-ianaithe leis an tuaslagán measctha a fháil, ansin cuir tuaslagán thiocyanáit guanidine leis an tuaslagán measctha, déan é a chreathadh agus a mheascadh go maith, agus ansin seasamh. Ansin, cuirtear iompróir ina bhfuil shilice leis, toisc go nglanfaidh thiocyanáit guanidine na cealla, agus comhcheanglófar na núicléatídí a scaoiltear ó na cealla leis an iompróir shilice. Tóg amach an t-iompróir ina bhfuil shilice, déan é a ionsú agus a dheighilt le eluent chun núicléatídí íonaithe a fháil.
Ansin, cuirtear tuaslagán NaCl leis an tuaslagán iarmharach as ar tógadh an t-iompróir shilice, baintear an tuaslagán measctha, ansin cuirtear protease ilchodach leis, ansin déantar hidrealú einsímeach micreathonnach, téitear an tuaslagán hidrealú einsímeach i ndabhach uisce. , lártheifneoirithe, tógtar an t-osnádúrtha, agus faightear an polaipeiptíde tar éis reo-thriomú.
Baineann an modh seo úsáid as na tréithe ar féidir le guanidine thiocyanate struchtúr na cille a scriosadh agus an próitéin a dhínádúrú. Ní amháin gur féidir núicléatídí agus peiptídí a bhaint as a chéile, ach tá buntáistí ag baint leis ó mhodh simplí agus ardéifeachtúlacht freisin. Ag an am céanna, seachnaíonn sé fadhb an imoibrithe idir imoibrithe bithcheimiceacha agus imoibrithe bithcheimiceacha á gcur le haghaidh eastóscadh.